實驗目的:吉林某研究院用含待測水樣(野外采集含重金屬水樣)的培養液對斑馬魚胚胎進行培養,用冷凍研磨儀對培養后的斑馬魚進行研磨,提取其體內核酸和蛋白質與凈水培養的斑馬魚進行對比,探究其基因表達差異,進行重金屬毒性檢測評估。
實驗準備:冷凍研磨儀一臺,2ml*24不銹鋼適配器一個、2ml塑料研磨管若干,以及實驗組和對照組斑馬魚各20條。
斑馬魚樣品前處理實驗研磨的操作步驟:
1.將20只斑馬魚魚苗加入2ml塑料離心管,放入研磨珠,加入PBS緩沖液。
2.打開機器并設置功率和時間,溫度設置到 -50°C,研磨次數1次。
3.將研磨管放入研磨儀適配器中,適配器固定到研磨儀中,關閉研磨儀蓋,開始運行。
4.結束后打開儀器取出研磨管,可進行后續核酸和蛋白的提取。
斑馬魚樣品前處理實驗研磨效果圖:
冷凍研磨儀在處理斑馬魚樣品時具有以下優勢:
1. 保護生物活性:在低溫條件下研磨,能夠有效保護斑馬魚體內易失活的生物大分子,核酸、蛋白質、酶等,最大程度地維持其生物活性。
2. 防止氧化:重金屬可以誘導氧化應激反應,使斑馬魚體內氧化物和抗氧化酶含量增多。低溫減少了樣本中易氧化成分的變質,保障實驗結果的準確性。
3. 降低污染風險:獨立的研磨管,避免了樣本間的交叉污染,確保實驗數據的可靠性。
4. 高效破碎:采用三維一體8字形研磨方式,快速高效率地破碎斑馬魚組織和細胞,使細胞內的物質充分釋放,提高后續實驗的提取效率。
冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN是一種快速、高效、制冷的研磨系統。它能在非常短的時間內將毛發、土壤、植物和動物的組織/器官、細菌、酵母、真菌、孢子、古生物標本等樣品完成研磨、粉碎、混合機細胞破壁。
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